Validação química em espectroanalítica para análise de miconazol

Abstract

A calibração é uma pratica conhecida quando se utilizam técnicas instrumentais de análise para determinar a concentração por meio da relação com outra grandeza. Após a calibração é feito a validação, a qual deve garantir que o método cumpra as exigências das aplicações analíticas assegurando a confiabilidade dos resultados. Na literatura diversos trabalhos trazem descritas metodologias para a validação de métodos analíticos em diferentes seguimentos, contudo nota-se a falta de materiais que façam uma transposição didática e que auxilie a aprendizagem do conteúdo de validação em espectroscopia para o ensino técnico em química. Desse modo, este trabalho, teve como objetivo desenvolver a validação analítica espectroscopia UV-Vis por meio de análise de fármaco, mais especificamente o miconazol. Os padrões de calibração foram preparados a partir do princípio ativo do nitrato de miconazol. Selecionaram-se três pomadas de nitrato de miconazol de diferentes laboratórios para o preparo das amostras. As curvas de calibração para o método de padrão externo e padrão interno foram preparadas a partir de uma solução estoque de miconazol 40 mg/L em metanol PA, obtendo diluições de concentrações de 3,2; 6,4; 8,0; 9,6; 14,4 e 16,0 mg/L para cada método. Para o método padrão interno foi preparado uma solução estoque de azul de metileno 264 mg/L e adicionou-se 1 mL em cada diluição. Para cada um dos métodos foram preparadas duplicatas das amostras de pomada 10 mg/L em metanol PA para os três laboratórios. Nas amostras de pomada de padrão interno foram adicionadas 4 mL da solução de azul de metileno. A curva de calibração de padrão externo foi preparada a partir de uma solução estoque de miconazol 30 mg/L em metanol PA e uma solução de amostra de pomada para cada laboratório, obtendo-se diluições de concentrações de 0; 1,2; 2,4; 4,8; 6,0; 7,2; e 10,8 mg/L. As análises do UV-Vis foram realizadas em triplicadas no comprimento de onda entre 200 e 800 nm. Os parâmetros como linearidade, exatidão, precisão e limite de detecção foram determinados conforme as especificações exigidas da ANVISA e do INMETRO. A linearidade pode ser confirmada pelo coeficiente de correlação: 0,8666- Padrão externo; 0,9676 (ABS206/ABS291), 0,9779 (ABS206/ABS653) -Padrão interno; 0,9195; 0,9685 e 09676 -Adição padrão. A análise de variância e o teste da significância da regressão para padrão externo indicou que o ajuste do modelo é satisfatório a um nível de confiança de 95%. Seu limite de detecção foi de 0,0103. O método padrão externo apresentou dois valores de exatidão dentro da faixa de 80-120% sendo eles de 97,83%; 107,41%. O método de padrão interno demonstrou ser preciso, pois os valores de coeficiente de variação obtidos (4,04%; 4,1% e 3,7%) e (2,25%; 2,72% e 2,45%) foram inferiores a 5%. A partir do desenvolvimento da validação analítica e dos resultados foi possível sistematizar um roteiro experimental que abrangesse de maneira simplificada a validação analítica utilizando o método espectrofotométrico na região do UV-Vis.